技術文章
使用點成LUNA-III™自動細胞計數儀進行精準細胞尺寸測量
關鍵詞:LUNA-III™ 自動細胞計數儀,NIST 可溯源粒徑標準,細胞尺寸測量,尺寸分選
1 引言
細胞尺寸是生物醫學研究及生物制造等應用中的關鍵參數,可反映細胞健康狀況與質量。在生物制造流程中,細胞尺寸用于評估批次培養或細胞治療中的原料質量,因此自動細胞計數儀的精準測量至關重要。LUNA-III™自動細胞計數儀 繼承了 LUNA™ 系列設備的標準尺寸分選功能,確保高精度細胞尺寸測量,并能在計數過程中及計數后對細胞群體進行分類分析。本研究展示了LUNA-III™自動細胞計數儀在六種NIST可溯源粒徑標準及3T3 細胞系上的測量精度和尺寸分選能力。
2 方法與材料
2.1 細胞系與試劑
實驗使用3T3細胞系,其培養基為含10%胎牛血清和1%的DMEM。細胞存活率評估采用0.4%臺盼藍(貨號 T13101)。此外為了驗證尺寸測量的精度,實驗使用了六種NIST可溯源粒徑標準(9.98、20.85、30.04、43.33、50.00和57.43 µm)。
2.2 基于NIST可溯源粒徑標準的精度驗證
NIST可溯源粒徑標準由美國國家標準與技術研究院(NIST)提供,可作為的測量基準。使用這些標準顆粒評估LUNA-III™自動細胞計數儀的測量精度,結果表明其尺寸測量準確度達 95.2% 以上,進一步驗證了其在尺寸測量中的高精度(圖1)。

圖 1:(A)LUNA-III™自動細胞計數儀計數的NIST可溯源粒徑標準(NT27N、NT30N、NT32N、NT33N、NT34N、#64200)圖像,紅色圓圈標示檢測出的顆粒。(B)表格對比NIST標準粒徑尺寸與點成LUNA-III™測量值及其精度百分比。(C)散點圖顯示了LUNA-III™自動細胞計數儀測量值與NIST標準值的線性關系,R2值達0.9999,表明其具備的線性度和準確性。
2.3 細胞尺寸測量
為了評估LUNA-III™自動細胞計數儀的尺寸測量準確性,我們混合了六種NIST可溯源粒徑樣本,并將計數范圍設定在 1 µm 至 90 µm 之間。計數完成后,系統生成細胞濃度與尺寸分布直方圖,并精準分類各尺寸標準顆粒。利用靈活的尺寸分選功能,可在計數后立即調整尺寸范圍,對目標尺寸進行精確標定,使測量準確度超過98%。

圖 2:LUNA-III™自動細胞計數儀在不同尺寸范圍(8~12 µm、18~22 µm、28~32 µm、41~45 µm、48~52 µm、55~59 µm)內對NIST標準顆粒進行檢測與尺寸分選的示例圖,每個圖像均配有相應的直方圖,以展示粒徑分布情況。
2.4 3T3 細胞尺寸測量
為了評估LUNA-III™自動細胞計數儀根據尺寸篩選3T3細胞(已知尺寸約18 µm)的能力,我們設定了多個尺寸分選范圍7~24 µm、1~11 µm、12~24 µm、16~20 µm(圖 3)。結果顯示,LUNA-III™自動細胞計數儀能精準檢測并篩選符合各尺寸范圍的3T3細胞,同時相應的直方圖也清晰展示了細胞尺寸分布情況,證明其在不同尺寸范圍內均能實現可靠、精準的測量。

圖 3:LUNA-III™自動細胞計數儀計數的3T3細胞圖像,顯示細胞在 7~24 µm、1~11 µm、12~24 µm和16~20 µm之間的尺寸分選情況,橙色圓圈標示檢測到的細胞。相應直方圖展示了各尺寸范圍內的細胞分布情況。
3 結論
LUNA-III™自動細胞計數儀可提供精準、可靠的細胞尺寸測量。在NIST可溯源粒徑標準的驗證下,其測量準確度達95.2%以上,并成功對混合粒徑顆粒及3T3細胞進行精準分類和尺寸分選,準確度超過98%。
LUNA-III™自動細胞計數儀具備以下優勢:
l 精準測量:適用于各種顆粒尺寸和細胞類型
l 可靠分選:確保細胞群體的精確分類
l 高重復性:測量結果一致性強
這些優勢使LUNA-III™自動細胞計數儀成為細胞尺寸、健康狀況和質量評估的理想工具。
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